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发布时间:2022-04-23 08:56:00 作者:格维恩
水中粪大肠菌群的常见检测方法
1、纸片法
采用纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体,将特定的培养基和显色物质附着在上面,通过粪大肠菌群在上面的生长、显色来测定的方法,即粪大肠菌在纸片培养基上呈红色菌落,菌落周围产生黄圈是粪大肠菌分解乳糖产酸使指示剂变色的结果。
2、酶底物法
将加入酶底物检测试剂的100ml水样注入51孔或97孔的定量测量盘中进行密封后培养,由于大肠菌群细菌能产生一种β-半乳糖苷酶分解PG使得培养液呈黄色,同时大肠埃希氏菌可以产生葡萄糖醛酸酶分解MUG,培养液将会在波长366nm紫外光下产生荧光反应。通过计算有黄色反应和荧光反应的孔穴数,可对照MPN表查出其代表的粪大肠菌群可能数水中粪大肠菌群。
水中大肠菌群的检测方法
大肠菌群是指在37℃培养24h内能发酵乳糖产酸,产气的兼性厌氧的革蓝氏阴性无芽孢的总称。主要由肠科中四个属内的细菌组成,即埃希氏属,柠檬酸属,克雷伯氏菌属和肠属。水中大肠菌群的检测方法,常用多管发酵法和滤膜法。多管发酵法可适用于各种水样的检验,但操作繁琐,需要的时间较长。滤膜法仅适用于自来水和深井水,操作简单、快速,但不适用于杂质较多易于堵塞滤孔的水样。
大肠的抗原成分复杂,可分为菌体O抗原、表面K
大肠的抗原成分复杂,可分为菌体O抗原、表面K抗原、鞭毛H抗原和菌毛F抗原四种。xue清学分型常涉及到O抗原及H抗原。O抗原为为细胞壁脂多糖Z外层的特异性多糖;H抗原位于鞭毛上,为鞭毛蛋白抗原。根据抗原结构不同,已知大肠有菌体O抗原170种,鞭毛H抗原60种,因而构成了许多xue清型。在肠道内正常栖居条件下的大肠,是不致病的。当机体免yi力低下,或当侵入肠道以外部位时,可引起肠道内或肠道外疾病,因此大肠为条件致病菌。在肠道内,某些xue清型的大肠可引起急性腹泻。这些能够引起肠道内急性腹泻的大肠统称为致泻性大肠。
大肠菌群的菌落计数检验方法
大肠菌群的菌落计数
检验方法
用灭菌吸管吸取待检样液1.0mL,加入无菌平内。每个样品接种三个连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿。于每个加样平内倾注15mL45~50℃的Aiiz-gal琼脂,迅速轻轻转动平,使混合均匀。待琼脂深固后,再倾注3mL-5mL Aliz-sal琼脂覆盖表面。同时将Aliz-gal琼脂倾人加有1mL上述无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的无菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后,翻转平板,干37+1℃培养箱培养18h-24h。取出平板,计数紫色(或红色)菌落。
培养基检验原理:胰酪胨提供碳氮源、维生素和矿物质满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾和磷酸氡二钾是培养基pH缓冲剂:月桂基硫酸钠可抑制革兰氏阳性菌的生长;大肠菌群可产生-半乳糖苷酶,分解液体培养基中的酶底物茜素-B-D-半乳糖苷(Aliz-gal),使素游离并与固体培养基中的铝、钟、铁、钱离子结合形成坚备(或红色)的罄合物,使菌落呈现相应的颜色。
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