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发布时间:2022-06-30 18:47:00 作者:格维恩
大肠菌群并非细菌学分类命名
大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及学方面并非完全一致,其定义为:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胚。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸、产气克雷伯氏菌和阴沟肠等。大肠菌群主要包括畅科中韵埃希氏菌属、柠檬酸属、魔雷伯氏菌属和肠属。这些属的细菌均来自于人和温血动物的肠道,需氧与兼性厌氧,不形成芽孢;在35~37℃条件下,48 小时内能发酵乳糖声酸产气,革兰氏阴性。大肠菌群中以埃希氏菌属为主,埃希氏菌属教俗称为典型大肠。大肠菌群都是直接或间接地来自人和温血动物的粪便。本群中典型大肠以外的菌属,除直接来自粪便外,也可能来自典型大肠排出体外7~30 天后在环境中的变异。所以食品中检出大肠菌群J表示食品受动人寝温血动物的粪便污染,其中典型大肠为粪便近期污染,其他菌属则可能为粪便的陈旧污染 [1] 。
水中大肠菌群检测:(水样稀释)
1):制备水样10-1、10-2的稀释液:用无菌移液管吸取10mL水样,
2):将水样放于盛有90mL无菌水和若干玻璃珠的锥形瓶中,充分振荡使混合均匀,使其中的细菌尽量呈单个存在,即为10-1稀释液。
3):再从10-1制备10-2稀释液,以此类推,稀释到所需倍数。
水中大肠菌群检测:(接种和培养)以无菌操作于5支三倍浓缩培养基(接种定应先检查杜汉氏小管内有无气泡)中各加入水样10mL,5支普通培养基试管中加入水样1mL,5支普通培养基试管中加入10-1稀释液1mL, 小心混匀放入37℃培养箱中培养24h 。此即5管法。
结果观察:37℃中培养24h后取出观察,观察有无气体(杜汉氏小管内有无气体)和酸产生(培养基有无变色)。在48h之间,培养管内倒置的杜汉氏小管内有任何量的气体积累,或培养基颜色从紫色变为黄色,便可初步断定为阳性反应。
滤膜法操作简便、快速
相比较而言,滤膜法操作简便、快速。该法是采用一种孔径约0.45μm的多孔硝化纤维膜或纤维膜滤膜过滤器过滤水样,使其中的细菌截留在滤膜上,然后将滤膜放在适当的培养基上进行培养,大肠菌群可直接在膜上生长,从而可直接计数。此法仅适用于水质较好、体积较大的水体,如大城市的水厂常采用此法,但不适用于杂质较多、易于阻塞滤孔的水样。
每次再去原液时,取样的均匀程度直接影响了后面的稀释结果
每次再去原液时,取样的均匀程度直接影响了后面的稀释结果,故我们在每次取样前必须充分摇匀。为了使数据更加地稳定及接近真实值,建议每个梯度稀释做平行样。这时,我们可以设计成取20ml原液加180ml无菌水配成200ml样或者取30ml加270ml无菌水配成300ml10倍稀释样,以此往下做梯度稀释。若是未知样且浓度可能会很高的时候,我们建议这样去稀释,因为这样我们便可以保证每个梯度至少有一个样。若已经大概了解水样来源及浓度,可直接梯度稀释到我们要的浓度,并做2-3个平行样。
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