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未知样需要进行浓度的摸索

对于未知样需要进行浓度的摸索，无论是多管还是酶底物法，都会有较大工作量。前期的梯度稀释及每个梯度做平行样都是无法避免的，当我们后期对水样浓度有了把握后便可以直接稀释到某个浓度，这样就减少许多的工作量了。由于酶底物法是已灭菌可直接用的选择性培养 基，比起多管法会更加简便、不用洗大量的管子。另外滤膜法在做脏水时就完全不适合了。

多管发酵法测定水中大肠菌群的操作方法

池水、河水或湖水①稀释水样：将水样稀释成10-1与10-2。②初发酵：分别吸取1mL10-2、10-1的稀释水样和1mL原水样，注入装有10mL普通浓度乳糖蛋白胨试管中。另取10mL和100mL原水样，分别注入装有5mL和50mL三倍浓缩乳糖蛋白胨水培养基的试管和三角烧瓶中。③以下步骤同上述“自来水”的平板分离和酵试验。所加水样体积为100、10、1、0.1mL的发酵管结果；水样体积为10、1、0.1、0.01mL的发酵管结果，即得每升水样中的大肠菌群数。

酶底物法步骤少,会更有优势

目前《水与废水标准检测法》、《生活饮用水标准检验方法》中的多管发酵法、滤膜法或是酶底物法，就算是定量范围大（1-2419MPN/100ml）的酶底物法面对较脏的地下水或者排污口的水样也需要稀释到100倍甚至1000倍。我们都知道，微生物实验的不稳定性，当我们进行稀释时，结果固然会有影响，我们要做的就是尽量减少误差。

实验步骤越少，结果偏差也会越小，所以酶底物法步骤少，会更有优势。在做稀释时，应保证取样量大，譬如10倍稀释：取10ml原液+90ml无菌水配成100ml10倍稀释液；若是要百倍千倍稀释，则需要进行梯度稀释，由中的10倍稀释样再取10ml，再加90ml无菌水，此时完成了100倍的稀释。若是千倍稀释，则需要从100倍稀释样中再取 10ml进行稀释。